laporan mikrobiologi ke 4

Laporan Praktikum                                         Hari/Tanggal   : Sabtu / 01 Oktober 2011

Mikrobiologi                                                   Waktu             : 11.00 WIB

                                                                        PJP                  : Rina Martini, M.Si

                                                                        Asisten            : 1. Harry Noviardi, M.Si

                                                                                                  2. M. Arif, S.Si

PENGHITUNGAN SECARA LANGSUNG

Kelompok 4

Novalia Lorenta (J3L110055)

                                                                             

PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA

DIREKTORAT PROGRAM DIPLOMA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2011/2012

Pendahuluan

Menurut Pelczar et al., (2005) istilah pertumbuhan umum digunakan untuk bakteri dan mikroorganisme lain dan biasanya mengacu pada perubahan di dalam hasil panen sel (pertambahan total masa sel) dan bukan perubahan individu organisme.
Menurut Rahmat (2010), istilah pertumbuhan pada bakteri mengacu pada perubahan dalam populasi total dan bukan perubahan dalam satu individu. Reproduksi bakteri merupakan pembelahan biner melintang, sehingga pertambahan populasi bekteri akan bertambah secara geometrik. Selang waktu yang dibutuhkan bagi sel untuk membelah diri atau untuk populasi menjadi dua kali lipat disebut waktu generasi.

Ada 3 cara perhitungan bakteri hidup, yaitu Standart Plate Count, Plate Count, Agar sebar. Standart Plate Count, pada cara ini pengenceran dilakukan dengan menggunakan sejumlah botol pengencer yang diisi sampel dan aqua destilata steril. Agar cair didinginkan sampai suhu sekitar 44ºC dan baru kemudian dituangkan ke cawan petri setelah agak membeku cawan dieramkan selama 24-48 jam (37ºC).

Plate Count, sampel dipipet lalu ditaruh dalam cawan petri kosong steril, lalu dituang dalam media agar yang mencair, dengan suhu sekitar ± 45ºC lalu digoyangkan dengan hati hati sehingga sampel dan media tercampur rata kemudian dibiarkan memadat.

Agar sebar, sebanyak 0.1 ml sampel ditaruh pada permukaan agar yang sudah memadat dalam cawan petri. Kemudian sampel ditaruh pada permukaan agar yang sudah memadat dalam cawan petri, lalu sampel diratakan di atas permukaan media tersebut dengan bantuan alat perata (Lay 1994). Selain itu ada juga dengan pengujian secara mikroskopik. Pengujian secara mikroskopik ditujukan untuk mengetahui struktur dan bentuk-bentuk dari bakteri (Hadioetomo 1996).

Tujuan

            Praktikum ini bertujuan menghitung mikroba yang ada pada media secara tidak langsung.

Alat dan Bahan

            Alat yang digunakan pada praktikum ini ialah cawan petri tabung inokulum, jarum oase, pembakar spirtus, rak tabung, sprider dan botol semprot alkohol.

            Bahan yang digunakan yang digunakan ialah sampel dari air selokan, air rendaman tahu, air cucian sayur, air sungai, air selokan,dan air cucian talenan.

Prosedur kerja

            Praktikum ini dilakukan dengan cara, yaitu sampel air dari berbagai lingkungan disediakan. Tabung steril dan yang telah diisi dengan cairan fisiologis disediakan dan diberi label 10^-1, 10^-2 ,10^-3 ,10^-4 ,10^-5 ,10^-6 dan 10^-7. Air dari sampel diencerkan dengan dipipet sebanyak 1mL dan dipindahkan ke tabung 10^-1 . Cara yang sama diulangi hingga tabung yang terakhir. Pengerjaan ini harus tetap steril dekat dengan api bunsen. Setelah itu, sebanyak 0,1mL dipipet dari tabung 10^-7 ke cawan petri yang berisi media(agar) dan disebarkan sprider. Penyebaran ini hanya diusahakan menempel saja spridernya pada media dan tidak merusak media itu sendiri. Teknik penyebaran pada cawan petri ini  dilakukan juga untuk tabung 10^-5 dan 10^-6. Selanjutnya diinkubasi selama 2×24 jam.

Data dan hasil pengamatan

Tabel 1 penghitungan mikroba dengan metode tidak langsung

Metode	Jumlah koloni			Jumlah koloni (CFU/mL)	Gambar
	10-5	10-6	10-7
Air sungai	TBUD	TBUD	TBUD	TBUD	10-5 10-6 10-7
Air selokan	TBUD	TBUD	TBUD		10-5 10-6 10-7
Air rendaman tahu	TBUD	TBUD	TBUD	TBUD	10-5 10-6 10-7
Air cucian talenan	TBUD	TBUD	TBUD	TBUD	10-5 10-6 10-7
Air cucian sayuran	TBUD	TBUD	87	109	10-5 10-6 10-7

Pembahasan

Penghitungan jumlah mikroba tidak langsung bukanlah menghitung satuan sel mikroba namun koloni yang terberbentuk dari satuan sel. Koloni yang tumbuh di dalam suatu medium itu tidaklah selalu berasal dari satu sel mikroorganisme, karena beberapa mikroorganisme tertentu cenderung untuk berkelompok atau berabtai. Bila ditumbuhkan pada suatu medium dengan lingkungan yang sesuai, maka kelompok bakteri ini hanya akan menghasilkan satu koloni saja. Berdasarkan hal tersebut sering kali digunakan istilah Colony Forming Units (CFU) yang digunakan untuk perhitungan jumlah mikroorganisme hidup (Dwidjoseputro 1996).

Perhitungan jumlah mikroorganisme ini seringkali digunakan pengenceran. Pengenceran dilakukan dengan botol pengenceran seperti lazimnya pada Standart Plate Count (SPC), namun dapat pula menggunakan tabung reaksi. Pada pengenceran dengan menggunakan tabung yang berisi cairan fisiologis dan terlebih dahulu dikocok dengan baik sehingga kelompok sel dapat terpisah. Pengenceran sel dapat membantu untuk memperoleh perhitungan jumlah mikroorganisme yang benar. Namun pengenceran yang terlalu tinggi akan menghasilkan lempengan agar dengan jumlah koloni yang umumnya relatif rendah (Hadioetomo 1996).

Pada metode perhitungan cawan dilakukan pengenceran yang bertingkat yang mana ditujukan untuk membentuk konsentrasi dari suatu suspensi bakteri. Setelah itu, penghitungan dengan teknik sebar. Agar sebar, sebanyak 0.1 ml sampel ditaruh pada permukaan agar yang sudah memadat dalam cawan petri. Kemudian sampel ditaruh pada permukaan agar yang sudah memadat dalam cawan petri, lalu sampel diratakan di atas permukaan media tersebut dengan bantuan alat perata (Lay 1994). Alat bantu untuk meratakan suspensi mikroba pada praktikum ini menggunakan sprider. Kemudian setelah diinkubasi selama 24- 48 jam, amati koloni yang tumbuh dan koloni yanng diamati hanyalah koloni yang berjumlah 30- 300 koloni (Gobel 2008).

Gambar 1 perkembangan koloni

Suatu medium cair akan berubah menjadi keruh sedangkan medium yang padat paada umumnya akan memperlihatkan pertumbuhan, baik itu pada permukaan dari medium maupun di dalam medium tersebut (Hadioetomo 1996). Cawan petri yang berisi media yang steril sebelumnya berubah menjadi media yang terlihat keruh. Mikroba yang telah diinkubasi mengalami pertumbuhan sehingga memenuhi permukaan agar. Sampel yang berasal dari air sungai pada hari penghitungan menghasilkan jumlah terlalu banyak untuk dihitung (TBUD). Jumlah koloni yang terbentuk telah menutupi permukaan media sehingga bukan koloni yang kecil lagi. Hal yang sama juga terjadi pada sampel yang berasal dari air talenan dan air rendaman tahu. Hal yang sama terjadi pada air cucian sayur yang pada pengenceran 10^-7 menghasilkan  10⁹ CFU/mL dengan jumlah koloni sebanyak 87.

Simpulan

            Berdasarkan hasil pengamatan didapat bahwa jumlah mikroba dari air sungai, air talenan, air selokan, dan air rendaman tahu tergolong jumlah yang terlalu banyak untuk dihitung dan pada serta pada air cucian sayur  10⁹ CFU/mL.

Daftar pustaka

Dwidjoseputro. 1996. DASAR-DASAR MIKROBIOLOGI. Jakarta : Penerbit Djambatan.

Gobel, Risco, B dkk. 2008.Mikrobiologi Umum Dalam Praktek, Universitas Hasanuddin, Makassar.

Hadioetomo R. 1996. Mikrobiologi Dasar-Dasar Dalam Praktek. Jakarta: Gramedia.

Lay B. 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: Raja Grafindo Persada.

Pelczar Michael J SJR dan ECS Chan. 2005. Microbiology. New York:Mc Grawwell Company. Newyork.

Rahmat Dedi. 2010. Kelenturan Fenotif Bakteri Streptococcus lactis pada Berbagai Kondisi Lingkungan (Phenotypic Elasticity of Streptococcus lactis on Various Enviromental Condition). Fakultas Peternkan UNPAD. Semarang.